用于細菌或真菌的涂片染色

【產(chǎn)品名稱】

革蘭染色液

【包裝規(guī)格】

單瓶（桶）包裝規(guī)格為：20ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1L、5L

每盒（箱）包裝規(guī)格為：4×20ml/盒、4×50ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒、4×1L/箱、4×5L/箱

【預期用途】

用于細菌或真菌的涂片染色

【檢驗原理】

革蘭染色法，由丹麥病理學家Christain Gram于1884年創(chuàng)立，是細菌學中很重要的鑒別染色法。通過此法染色，可將細菌鑒別為革蘭陽性菌（G+）和革蘭陰性菌（G-）兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步結(jié)果是一樣的，但在G+細胞中，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導致孔隙變小，由于結(jié)晶紫和碘的復合物分子太大，不能通過細胞壁，保持著紫色。在Gˉ細胞中，乙醇處理不但破壞了胞壁外膜，還可能損傷肽聚糖層和細胞質(zhì)膜，于是被乙醇溶解的結(jié)晶紫和碘的復合物從細胞中滲漏出來，當再用襯托的染色液復染時，顯現(xiàn)紅色。紅色染料雖然也能進入已染成紫色的G+細胞，但被紫色蓋沒，紅色顯示不出來。 

【儲存條件及有效期】

0℃-35℃儲存，原包裝未開封染色液的有效期為24個月，在有效期內(nèi)的已開封染色液在開封后6個月內(nèi)使用完，每次用后應及時擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。

生產(chǎn)日期、有效期詳見外盒或瓶上標識。

【樣本要求】

涂片時必須注意細心操作，涂片薄而均勻。制備的涂片應自然干燥，采用加熱固定時，固定溫度不宜過高，以背面接觸手背不燙為準，否則可能使細菌形態(tài)改變影響觀察結(jié)果。

【檢驗方法】

1.涂片：取待檢細菌，于載玻片中央涂成薄層或在載玻片上滴如少許無菌水，取菌與水混合均勻，涂成一薄層；

2.干燥、固定：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥，也可以用甲醇或乙醇固定；

3.初染：滴加結(jié)品紫染色液染色0.5~1.5分鐘，水洗，甩干；

4.媒染：滿加碘溶液覆蓋載玻片0.5~1.5分鐘，水洗，甩干；

5.脫色：滴加脫色液搖動10~30秒，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時為止，立即用水沖去脫色液，甩干；

6.復染：滴加沙黃染色液或復紅染色液染色20~60s，水洗；

7.濾紙吸干或在空氣晾干，鏡檢。

【檢驗結(jié)果的解釋】

革蘭氏陽性菌呈藍色至紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。